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WB实验总有几个泳道跑不出来条带

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_iutuze94

求助各位大神,WB 实验内参每次只有中间的四个泳道跑不出条带,奇怪的是每次只有内参跑不出来,其他的蛋白是出来的。一抗重新配了,但还是如此。求各位WB大神指点,是什么原因导致的,怎么解决呢?

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4 个回答

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juyue2010

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内参蛋白分子量小,要不是跑胶跑出去了,要不是转膜转过了

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毛利小五郎的徒弟

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检查泳道是否通畅,可能是泳道有堵塞。

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loveliufudan

有帮助

这种情况可能是因为内参抗体和其他抗体的性质不同,导致其在电泳过程中迁移速度不同,因而出现内参跑不出条带的情况。

以下是一些可能导致内参跑不出条带的原因和解决方法:

内参抗体浓度过低:可以尝试增加内参抗体的浓度,通常建议内参抗体的浓度要比其他抗体高。

卷迹问题:在转移膜的过程中,内参抗体可能会发生卷迹,导致电泳过程中无法正确迁移,可以尝试将转移膜的质量进行检查。

不同种属的抗体:如果使用的内参抗体和其他抗体来源不同,可能会出现电泳迁移速度不同的情况,可以尝试使用同种来源的抗体。

组织或细胞裂解液质量问题:可能是由于裂解液中蛋白质含量太低,或者含有过多的脂质或者其他物质干扰了电泳过程。可以尝试优化细胞或组织的裂解方法,或者尝试使用不同的提取液。

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balalaLy

有帮助

换一种内参试一下,可能是那几个组的处理对原内参表达有影响

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