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带MBP标签的蛋白纯化

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成语接龙

纯化带MBP标签的蛋白时,MBP会掉下来,是什么原因呢?

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2 个回答

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loveliufudan

有帮助

MBP标签通常被用于帮助纯化目的蛋白,但是有时MBP标签本身会从目的蛋白中脱离。这可能是由于以下原因之一:

蛋白结构域:MBP标签可能位于目的蛋白的结构域中,这可能导致MBP标签在纯化过程中被蛋白酶剪切或脱离。

蛋白不稳定:目的蛋白可能不稳定,并且在纯化过程中会失去MBP标签。

未正确装配:MBP标签可能未正确装配到目的蛋白中,导致MBP标签在纯化过程中被去除。

纯化条件不当:使用的纯化条件可能不适合MBP标签的稳定性,导致MBP标签在纯化过程中脱落。

为避免MBP标签脱落,建议在纯化过程中使用温和的条件,并且在保证目的蛋白完整性的同时,尽量减少蛋白酶剪切等因素的影响。

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土井挞克树

有帮助

1.缓冲液里盐浓度太高(>1M)
2. 缓冲液里有强去污剂如SDS,或者是有咪唑/尿素/盐酸胍之类的强电解质
3. 目标蛋白和MBP形成了胶束状结构

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