洛噜啦噜啦嘞
求助各位前辈,免疫沉淀实验中,我用BSA干粉配成的溶液做封闭剂,然后样品跑电泳。。BSA粉末里面除了bsa,还没有其他蛋白等影响考染结果(产生其他条带)
毛利小五郎的徒弟
会有背景干扰,粉末有时候溶解不足就会产生背景干扰
sswei
如果没有其他物污染,不会产生杂带。但是最好做一对照。
loveliufudan
BSA 粉末中除了 BSA 外,应该不会有其他蛋白影响结果的考察,但是也有可能存在其他可能影响结果的因素。
如果你的实验结果中出现了非特异性条带,可以考虑以下几个方面进行排查:
溶液制备:封闭剂的制备过程中可能存在问题,如BSA溶液的 pH 值不对、过量使用等。
抗体选择:免疫沉淀实验中使用的抗体可能存在非特异性结合,可以更换试剂盒中提供的抗体或选择其他经过验证的抗体。
洗涤缓冲液:洗涤缓冲液的 pH 值、离子强度和洗涤次数等都会影响非特异性背景信号的出现。
实验操作:实验操作中的细节也会影响结果的准确性,例如离心速度、温度、时间等。
建议你从以上几个方面进行排查,并严格按照试剂盒提供的操作步骤进行实验,以保证实验的可重复性和准确性。