免疫沉淀IgG出现条带怎么改进？

珠子少加点，wb抗体稀一点，曝光时间短一点。珠子抗体这些不要贪多，不然容易有非特异性条带

加入的A蛋白抗体和IgG 抗体，在最后一步的煮样中，被β巯基乙醇破坏了结构，变成了重链和轻链，随后由于A蛋白抗体和你的B蛋白抗体种属来源相同，又被你的B蛋白抗体识别出来，所以显影就出现了条带。

可以采用抗体特异性封闭的方法进行封闭！方法如下：

1 常规电泳转膜

2 利用抗FC片段抗体进行封闭重链的条带

3利用抗Fab片段的抗体进行轻链封闭

4 加一抗进行杂交

5 洗涤加二抗进行杂交

6 显色即可

注意事项 封闭用的抗体不可和杂交用的一抗同源！