western blot免疫印迹实验，目的带很弱，要怎么加强

条带弱的原因可能有以下几个方面：

①. 因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量，也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度更高的发光底物来调整。

②. 蛋白没有充分转移到膜上。转膜后可通过预染Marker判断转膜效率，也可用丽春红染膜、用考马斯亮蓝染胶，判断转膜效率。

③. 抗体效价不高，用量不足，孵育时间太短，或抗体反复使用保存不当而失活。可考虑更换效价更高的抗体，或提高抗体稀释度，延长抗体孵育时间；若怀疑抗体失活，可用斑点杂交实验确定抗体活性。

④. 曝光时间太短。可适当延长曝光时间。

增强上样浓度和上样量，延长一抗孵育时间

条带较弱可能的原因及建议如下： (1) 蛋白上样量不足 增加上样量。 (2) 样本中不含目标蛋白 设置阳性对照以确定样本中是否含目标蛋白。 (3) 封闭过度 选用合适的封闭液，缩短封闭时间。