ELISA操作咨询各位前辈

ELISA中加样须注意如下问题：

　　1.吸取样品时，加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体，这样会导致液体残留在吸头上，加样不准确!

　　2.不要将吸头伸入孔中，一方面若接触孔底可能压弯吸头，另一方面可能会将孔中的液体吹起来，加样不准确!

　正确的加样方法应为45度，吸头贴着孔壁加入，应注意：

　　1.角度太小，会使液体残留在孔壁上，导致加样不准确!

　　2.吸头应当贴着管壁和液面的交界处。

少量多次的加样，避免加样差距太大也避免污染

出现A样本两个值一样，而B样本的双孔相差很多可能是由于操作误差引起的。以下是一些建议：

在加样前，确保所有试剂和标本充分混合。混匀试剂和样本可以通过轻轻摇动或翻转容器来完成。

确保吸头不会接触到其他表面或污染物，特别是在更换吸头时，避免接触到其他试管或表面。

确保吸头被完全浸入液体中，并且没有气泡。吸头可以在吸取液体时先下降到液面以下，然后慢慢吸取，确保吸头完全浸入液体中。

每次更换吸头时，请先吸取一些洗涤缓冲液，并将其吸入和排出几次，以确保吸头干净，并排出任何悬浮在吸头中的液滴。

在加样时，尽量保持吸头和板孔之间的距离一致。不同的距离可能会影响吸头和板孔之间的液体移动和吸取量。

每次加样后，尽量让吸头在空气中震荡，以避免液滴残留在吸头中。

最后，确保操作人员在进行ELISA操作之前经过充分的培训和质量控制测试，以减少操作误差的影响。