秋秋欣欣
Wb结果显影可以看见很弥散的条带,不集中,是为什么啊?
毛利小五郎的徒弟
抗体特异性差的原因,造成了非特异性染色,建议更换特异性高的抗体
sswei
原因有:
1,蛋白量太少,或者目的蛋白少
2,转膜没转上或者转过了
3,抗体浓度不够,或者特异性不强
4,显影液选用超敏显影液。
需要一一排除。
loveliufudan
Western blot结果显影出现弥散的条带,不集中的原因可能有多种:
样品质量问题:如果样品的蛋白质含量过低或者质量不佳,可能会导致Western blot结果出现弥散的条带。
蛋白质转移问题:如果蛋白质没有完全转移到膜上,或者转移的过程中出现了空气泡,也可能导致Western blot结果出现弥散的条带。
抗体结合问题:如果使用的抗体与目标蛋白结合不充分,或者抗体与非特异性蛋白结合,也可能导致Western blot结果出现弥散的条带。
显影反应问题:如果显影反应时间过短或者过长,或者显影液的配制不正确,也可能导致Western blot结果出现弥散的条带。
因此,需要仔细检查Western blot实验过程中的每个步骤,确定哪个步骤可能存在问题,从而找出Western blot结果出现弥散的条带的原因。