balalaLy
抗体孵育时间,还有TBST的ph值也是会有影响的
whilt-shirt
有可能是另外一张膜转膜时出了问题
loveliufudan
以下是可能的原因:
一抗或二抗过期或失活,建议更换新的抗体或检查保存条件。
一抗或二抗浓度过低或过高,建议调整浓度或进行稀释曲线实验。
膜上蛋白量过低或过高,建议调整上样量或进行质量控制实验。
转膜不充分或转膜时间过长,建议优化转膜条件或更换新的转膜仪器。
显色时间不足或过长,建议控制显色时间或更换新的显色试剂。
huarenqiang5
原因有很多,比如电泳,转膜,敷抗体,显色等等。WB 最关键的还是转膜和敷抗体步骤,可能是你敷抗体的时候敷的不均匀。
毛利小五郎的徒弟
首先考虑肯定是抗体的问题,抗体失效或者太少都是不可以的