如何确定已有目的基因的CDS在DNA上是完整的，而不是拼接得来的，即如何确定该目的基因的CDS在DNA上没有内含子的插入。

内含子外显子都是相对的，在可变剪切情况下有些内含子就变成了外显子。大多数物种有基因组数据库如拟南芥的TAIR网站（www.arabidopsis.org），在数据库中搜索基因名，上面有相对准确的外显子内含子标注（可变剪切的存在导致外显子内含子并不是绝对的）

可以验证内含子的序列通过互补来验证是否插入

要确定目的基因的CDS（编码序列）在DNA上是完整的，您可以采取以下步骤：

从您感兴趣的生物体中提取基因组DNA，并进行PCR扩增该基因的CDS区域。PCR扩增时，您可以选择引物位于CDS的两端，以扩增整个CDS。

将PCR扩增产物进行凝胶电泳分析，确认扩增的片段大小是否与预期一致。如果扩增产物的大小与预期一致，那么这个基因的CDS就可能是完整的。

可以将PCR产物进行测序，以确认CDS序列的完整性。您可以选择将PCR产物克隆到质粒载体上，然后进行Sanger测序，或者直接对PCR产物进行下一代测序（NGS）分析。

比对序列数据，确认CDS序列是否有内含子插入。如果存在内含子插入，CDS序列与参考序列的比对结果将会呈现不连续的区域，且不同的外显子之间会有Intron的存在。

除了以上方法，还可以使用转录组数据或RNA测序技术，通过检测目的基因的mRNA，进一步确认该基因的CDS是否完整。如果检测到mRNA，且mRNA的序列覆盖整个CDS区域，那么这个基因的CDS就可能是完整的。