为什么蛋白杂到两条带？？

我觉得最合理的解释就是同时存在两种蛋白，也就是说有混杂因素。

可能原因有：

1、抗体特异性不好,或者已经变质（包括一抗和二抗）

2、封闭不好

3、目标分子有降解,磷酸化等修饰,

3、洗膜不彻底,

4、曝光时间太长等等。

因为WT组也有，可以判定这是一个抗体产生非特异的蛋白印迹，分析的时候去掉就好

可能是一抗浓度过高，和细胞蛋白有了非特异性结合。