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看了一些文献,实验小白看到了免疫共沉淀实验 想了解一下这个实验能验证两个蛋白的相互作用,那具体原理是怎样的呢,求解答。
毛利小五郎的徒弟
在免疫共沉淀中,由于其对靶蛋白的结合与沉淀由另一个与之发生相互作用的蛋白替代。而这个蛋白的基因是已知的,所以可以推测靶蛋白的基因
此外在免疫共沉淀的基础上,通过进一步与其它技术的结合,如聚丙烯酰胺凝胶电泳,进一步对靶蛋白的的分子量等特性进行鉴定。
Eason老歌迷
当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质相互作用被保留了下来,假如细胞内存在XY蛋白复合物,用X(X也称为诱饵蛋白)的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y(Y也称为靶蛋白)也被沉淀下来。因此在细胞裂解液中加入X的抗体沉淀蛋白X,随后利用蛋白印迹WB检测沉淀中是否存在蛋白Y,如果存在,则说明细胞内存在XY蛋白复合物,即蛋白XY存在相互作用。
balalaLy
大概的原理就是两个蛋白有结合,那么用其中一种蛋白的抗体去拉它,就把跟它结合的另一个蛋白一起拉下来了