请问有没有大佬做过NLRP3相关的wb？
核糖核酸少糖少酸
1：就是NLRP3，IL—18，Caspase的这种相关性的条件都附图。
2：NLRP3采用的是8%的胶，其他2个是12%，条件跑IL—1贝塔还是很稳定。
电泳浓缩80v，分离120v，转膜260ma
3：想请教一下这种出现这么弱是什么问题呢？
2 个回答
麻黄连翘赤小豆
有帮助
蛋白表达比较低
转膜效率低
封闭没封好
土井挞克树
有帮助
弱表现出现可能是因为转膜效率低
可能原因解决方案转膜缓冲液PH值与目的蛋白等电点相近提高转膜缓冲液PH值凝胶与转印膜之间存在气泡转膜时应排除所有气泡凝胶与转印膜两侧滤纸大面积接触滤纸、转印膜裁剪与凝胶大小相等
转印膜种类选择不当使用质量可靠的PVDF或者NC膜电压或者电流过小调高电压或者电流转印时间过短或者过长根据蛋白大小和装置类别选择合适的转印时间湿转过程中温度过高使用预冷的Western转膜液，湿转置于冰水中
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