磷酸化和总蛋白变化趋势一致

老外的文章，总蛋白和磷酸化蛋白一般都会做WB。对结果的解读，以下意见，供参考：（1）内参一致，总蛋白不变，磷酸化蛋白表达升高或者降低：说明经过某种处理（外部操作，抑制剂，上游蛋白基因敲除或者siRNA等）后，对该蛋白（及其代表的信号通路）的活性产生影响（促进或抑制）；（2）内参一致，总蛋白升高或者降低：说明经过实验组的处理方法能够诱导总蛋白的表达或者降解。至于磷酸化活性的变化，和总蛋白的表达高低有关，该种处理方式可能同时影响该蛋白的表达与磷酸化形式，对该蛋白代表的信号通路发挥作用

1. 首先确认内参是否整齐

2 其次多次重复后，进行灰度分析，进行半定量，再次确认是否有差异是否具有统计学意义

3 如果确实有差异，是否可以考虑某种机制影响了其表达及活化，也可以做qPCR看看是否一致

总蛋白通常是不会有很明显的变化，上样时蛋白定量了么，内参跑的效果怎么样，用指标的灰度值和内参的做个半定量的分析，看看它的变化是否相符