ELISA检测，稀释液OD值比原液高
上树的小羊
最近做了个大鼠的肺支原体ELISA检测，取的大鼠血清，操作步骤按照试剂盒的说明进行，不过试剂盒说明书没有说明样本需要稀释，又提供了样本稀释液，所以我将每一组的血清按照原液-稀释25倍-50倍-100倍来加样，最后得出的结果有4组出现稀释后的OD值比原液的高，所以想请教各位大佬操作方法哪里出了问题。
4 个回答
圆圆v5
如果不是因为原液浓度太高导致HOOK了所以不显色，那就考虑这个ELISA是不是竞争法的原理，有些竞争法表现为浓度越高越不显色，这个可以对照定标曲线看出来。
土井挞克树
试剂盒提供的是否是已经稀释过的，这个是需要确定的，如果已经稀释，那么你再次稀释结果肯定是不准确的
上树的小羊
试剂盒提供了样本稀释液，但说明书上的操作步骤没有样本稀释这一条，所以样本的稀释是我自己做的
灵枢天问
因为抗原抗体的结合是有一定比例的超过这个比例可能反而会影响所以这种情况也有可能
汤姆卜丽波
不知道你这个是怎么排的，我们一般是实验组三个重复，对照组三个重复，看数据我觉得可能还是稀释了会好一些，抗原抗体都正好饱和可能是
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