短岛热茶
如题,我们的目标是将荧光基团连接在多肽上,做一个荧光成像的探针。文献里大多数测定亲和力的方法都是用一个带有125I放射性物质的标准竞争配体,或者是做成爬片用激光共聚焦显微镜拍照后用image j统计荧光强度。因为我想用96孔板做,所以能不能将实验设置成这样呢:
预实验得出与细胞膜上抗原结合荧光强度最大的荧光探针浓度,用此浓度的探针与不同浓度的竞争性配体在铺好细胞的96孔板里共孵育,洗3次后用荧光酶标仪测每个孔的荧光强度,由此求最大半抑制浓度。
这个方法可行吗,我目前没有搜到这个方法的文献,求各位大神指导!
土井挞克树
我觉得你这个思路是可行的,但是你在没有标准度的情况下,如果你首次测定的最大浓度有问题,那么后续实验结果则不能保证正确
短岛热茶
请问这里标准度指什么呢?我的实验计划是设置不同浓度的荧光多肽,孵育于96孔板的细胞内,类似测定结合饱和度
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