解析多肽分离实验

多肽混合物
0.05 mol／L 和 0.25 mol／L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃) 0.1 mol／L 氢氧化钠
75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器

1. 用以下溶液冲洗进行预处理毛细管：

10 倍柱体积的 0.1 mol/L NaOH，在低压（0.5 lb/in²）下

10 倍柱体积的水

4 倍柱体积的 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30。

存储柱于 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30，25℃。

2. 将 10 nmol （约 300 g） 溶于 10 ml 的 0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30，制备多肽混合物。以每管 100 μl 冻存未用的混合物。

3. 在 0.5 lb/in²，10 s 内用低压注射上样 10～20 nl 样品。

4. 使用以下条件分离多肽混合物：

电解质：0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.3

探测波长：200 nm

温度：25℃

电压：25 kV

5. 用以下溶液清洗柱子：

0.5 min，水

1.0 min，0.1 mol/L NaOH

1.5 min，水

1.0 min，0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液，pH 2.30

室温存储柱子于运行缓冲液或水中。