材料与仪器
0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃) 0.1 mol/L 氢氧化钠
75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器
步骤
1. 用以下溶液冲洗进行预处理毛细管:
10 倍柱体积的 0.1 mol/L NaOH,在低压(0.5 lb/in2)下
10 倍柱体积的水
4 倍柱体积的 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30。
存储柱于 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30,25℃。
2. 将 10 nmol (约 300 g) 溶于 10 ml 的 0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30,制备多肽混合物。以每管 100 μl 冻存未用的混合物。
3. 在 0.5 lb/in2,10 s 内用低压注射上样 10~20 nl 样品。
4. 使用以下条件分离多肽混合物:
电解质:0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.3
探测波长:200 nm
温度:25℃
电压:25 kV
5. 用以下溶液清洗柱子:
0.5 min,水
1.0 min,0.1 mol/L NaOH
1.5 min,水
1.0 min,0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30
室温存储柱子于运行缓冲液或水中。
来源:丁香实验