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求助 救救孩子吧,原核表达的蛋白一直诱导不出来是啥原因

相关实验:IPTG 诱导蛋白表达实验

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dxy_96emyjs

实验过程中菌落PCR的条带位置有点奇怪,但是测序结果又是正确的,那我的菌应该是没问题的,可是一直诱导不出来,我有点担心是诱导剂的问题但是我们实验室的同学说可能性不大

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5 个回答

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Topmicro

有帮助

测序结果正确但是pcr条带位置奇怪的话应该是你设计问题,不应该是诱导剂的问题,建议你再捋一遍自己的序列。

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vlinine

有帮助

诱导剂的问题确实不大,可以试试其他诱导方法

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汤姆卜丽波

有帮助

诱导一般没问题只要掌握好时间和IPTG的量,有可能是后续操作,你后面是超声破碎然后层析跑胶还是柱回收跑胶

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申东熙老伯

有帮助

可以提一下质粒换蛋白诱导的菌比如BL21去试试诱导。

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bamboopiggy

有帮助

先确定你的原核表达载体上的序列是对的,一般诱导不会出现大问题,最多就是量的多少,主要还是序列要对,要有start code,不带跨膜的可以切断的位置。

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