毕赤酵母胞内表达

dxy_3dsielgw

2022-09-05

载体是ppinkhc，毕赤酵母胞内表达病毒衣壳蛋白和囊膜蛋白，在蛋白C端加入了his标签，筛选阳性克隆之后诱导3-4天，都尝试过，甲醇浓度也做过对比，但是wb鉴定表达出来的蛋白都比目的蛋白小很多，这是什么原因啊

灵枢天问

2022-09-07

有帮助

换个抗体吧，你再查查文献看看有没有特异性更高的抗体

汤姆卜丽波

2022-09-05

有帮助

你是特异性抗体敷出来，如果这样不是目的基因那有没有考虑过是抗体有问题呢

dxy_3dsielgw

2022-09-06

his抗体孵出来的，更换过抗体，结果是一致的

Dr_劉医生

2022-09-05

有帮助

可能是你的一抗浓度过高，适当降低一抗稀释比，目的条带就会减弱的

dxy_3dsielgw

2022-09-06

问题是蛋白质的分子量大小是不对的，为什么表达出来的蛋白质和目的蛋白不一致呢？

Dr_劉医生

2022-09-14

分子量不一样，是蛋白降解的原因吗？