毕赤酵母胞内表达
dxy_3dsielgw
载体是ppinkhc，毕赤酵母胞内表达病毒衣壳蛋白和囊膜蛋白，在蛋白C端加入了his标签，筛选阳性克隆之后诱导3-4天，都尝试过，甲醇浓度也做过对比，但是wb鉴定表达出来的蛋白都比目的蛋白小很多，这是什么原因啊
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3 个回答
灵枢天问
有帮助
换个抗体吧，你再查查文献看看有没有特异性更高的抗体
汤姆卜丽波
有帮助
你是特异性抗体敷出来，如果这样不是目的基因那有没有考虑过是抗体有问题呢
dxy_3dsielgw
his抗体孵出来的，更换过抗体，结果是一致的
Dr_劉医生
有帮助
可能是你的一抗浓度过高，适当降低一抗稀释比，目的条带就会减弱的
dxy_3dsielgw
问题是蛋白质的分子量大小是不对的，为什么表达出来的蛋白质和目的蛋白不一致呢？
Dr_劉医生
分子量不一样，是蛋白降解的原因吗？
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