血管钙化欢迎交流
各位大佬,最近新手刚开始跑wb,跑的好几次都是下面图片这样,一张膜只敷了一个贝塔-actin,上面有很多非特异性条带,抗体是单克隆新配的。新蛋白旧蛋白跑出来都是这样。有遇到过同样问题的嘛?
Dr_劉医生
出现非特异性的杂带可能是抗体纯度不够,高纯度抗体条带特异性更好,建议更换抗体;此外也可以加长BSA封闭时间,和洗膜的时候多洗几次可以降低杂带干扰
灵枢天问
杂带这么多只能说你的抗体特异性不太好,换一种抗体试试
balalaLy
一抗:浓度高,适当稀释
封闭:不充分,用脱脂牛奶封闭
洗涤:适当延长洗涤时间