wb结果成这样是什么原因呢？一共4个孔，第二个孔条带很弱，其他孔都不成条带，要么是黑坨坨，要么就像第四个孔条带只有半截

感觉你第三个孔很好，第一个孔是蛋白浓度稍微有点高，成团了，二应该就是表达量低。但是四可能是你转膜没有转好。

蛋白的上样量是多少呢？排除上样量少的问题，就是转膜把条带转走了，没留在膜上。

蛋白从冰箱取出后可以适当加热，使蛋白之间充分解链，使用的loading buffer甘油浓度不能太高，不然太粘稠。