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小分子量蛋白WB求助

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_rvidsskw

请求WB大神降临

我的蛋白分子量11KDa

电泳条件80V,1小时,跑到marker刚刚分开就停下。溴酚蓝指示带大概在胶的下三分之一的位置。

转膜条件200ma.90min

显影后,目的条带呈现波浪状,不直还连在一起。头疼

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4 个回答

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bamboopiggy

有帮助

用15%的胶,别的条件不变再跑跑看,感觉你用的是10%的胶。

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balalaLy

有帮助

看你的marker都已经有弥散了,如果不是泡的时间久,就换一种loading吧,然后用15%的分离胶或者用商品化的梯度胶,4%-20%的那种,小分子可以跑得很好

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dxy_rvidsskwuser-title

你好,我用的就是4-20的梯度胶,loading用的是康为世纪

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冷泉港蛋白

有帮助

有些弥散,换种凝胶。

常规的 Tris-SDS-PAGE 电泳只能分辨大分子蛋白,对于相对分子量小的,尤其是 10 kD 以下的蛋白分辨率极低。而 Tricine-SDS-PAGE 可以很好的分离分子量在 1-10 kD 的蛋白

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whilt-shirt

有帮助

可以用12%的胶和0.22um的膜

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