10%的预制胶，这条带是不是典型的哑铃型?求解决?后面反白跟封闭有关系吗?

用预制胶，要把梳子齿里的甘油冲干净，否则会影响上样的样子。反白，可能是你抗体浓度太大，或蛋白浓度太高，导致辣根过氧化酶反应太强，出现的烧心现象。

这个就是哑铃型条带。可能是你的胶未混匀，也可能是凝胶时间过短。或者是你转膜的时候三明治夹得太紧。反白可能你二抗孵育太久了。

有可能是上样量过高或者抗体浓度过高导致的，建议降低上样量和抗体浓度