急！！！求助：ELISA试剂盒测定细胞培养上清中的酪蛋白浓度，为什么含血清比无血清浓度更低？
T清风自来
请问通过酶联免疫试剂盒检测第三代奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白的浓度，结果发现含血清组培养的细胞OD值均低于标准曲线最低浓度的OD值，且计算出的酪蛋白浓度均为10以内，而无血清饥饿处理的细胞酪蛋白浓度却在100~200之间，这是什么原因？有血清换无血清饥饿后，弃含血清培养基并用PBS清洗后换无血清后取细胞培养上清为0h，此时上清用ELISA试剂盒检测酪蛋白浓度应该是多少？为0吗？
3 个回答
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包被抗原的浓度较小，阳性血清中抗体量大于包被抗原的量而出现钩状效应（后带效应），见意将阳性血清做一下浓度曲线看一下，或者采用棋盘滴定或单项滴定重新确定包被抗原浓度
Eason老歌迷
不知道你所谓的高是相对什么而言的高，阴性一般是相对数值，选用的波长和抗体的滴度都可能使数值偏高，关键是看你的阳性和阴性的比值是怎么样的，一般要大于2.1才算是正常的阳性。包被抗原的浓度较小，阳性血清中抗体量大于包被抗原的量而出现钩状效应（后带效应），建议将阳性血清做一下浓度曲线看一下，或者采用棋盘滴定或单项滴定重新确定包被抗原浓度。
bamboopiggy
这个实验我没有做过，但是分析一下，1.有血清的培养基，细胞处于有营养的状态，自己分泌的蛋白可能少，所以酪蛋白含量低。2.饥饿状态下，乳腺细胞自己分泌自己合成的蛋白，这个时候，分泌的酪蛋白就高了。3，你说的那个从有血清换成无血清的0h，应该可以认为酪蛋白为0
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