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丁香通

最近在做毕赤酵母蛋白诱导,总是失败?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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嘻哈哈哈321

老师让做毕赤酵母,电转总是长不出来,有很多问题,希望有好心人可以帮帮忙。

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2 个回答

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Eason老歌迷

有帮助

可能是有几个原因。如果用GS115表达不出蛋白,我们换成KM71H后,大部分克隆能表达。 我们尝试过在28度和室温下诱导表达,表达水平可能都不低。ph的话就选择用6.0——6.8,BMMY的pH7.0-7.5比较合适。

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天一湖医者

有帮助

一般情况下,活化的培养基通常是YPD,筛选或诱导表达时才用BMG的?另外你的菌种是野生菌还是工程菌,BMG里有否添加抗生素?如果有抗生素的话,很可能是质粒丢失了。

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