细胞中NFKB和AKT蛋白表达低但磷酸化水平高，可以说明两个蛋白被激活了吗？

相关实验：蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)

小阿纯你认真点

2022-07-09

提取总蛋白然后测p65，p-p65，AKT，p-AKT，结果发现p-p65和p-AKT表达升高，但蛋白表达量降低了，这种情况是什么原因呢？只要磷酸化与总蛋白比值升高就说明两种蛋白被激活吗？

4 个回答

天一湖医者

2022-07-10

有帮助

可以，细胞中NFKB和AKT蛋白表达低但磷酸化水平高，可以说明两个蛋白被激活了。

Eason老歌迷

2022-07-10

有帮助

你现有数据有限，难以证明。1. 免疫荧光的检测，即p65是否入核，这是NF kappa B通路活性检测的常用指标，说服力较强；2. luciferase 测p65转录活性指标；3. WB法分别检测胞浆中、核内磷酸化p65的含量变化，一般要求高点的杂志会要求分别测这个4. IHC等也行；5. EMSA（电泳迁移技术）看看。

bamboopiggy

2022-07-10

有帮助

主要磷酸化的升高了，就可以说是被激活了

whilt-shirt

2022-07-10

有帮助

是的，只要磷酸化水平比上非磷酸化蛋白水平的值升高就能说明被激活了