小阿纯你认真点
提取总蛋白然后测p65,p-p65,AKT,p-AKT,结果发现p-p65和p-AKT表达升高,但蛋白表达量降低了,这种情况是什么原因呢?只要磷酸化与总蛋白比值升高就说明两种蛋白被激活吗?
天一湖医者
可以,细胞中NFKB和AKT蛋白表达低但磷酸化水平高,可以说明两个蛋白被激活了。
Eason老歌迷
你现有数据有限,难以证明。1. 免疫荧光的检测,即p65是否入核,这是NF kappa B通路活性检测的常用指标,说服力较强;2. luciferase 测p65转录活性指标;3. WB法分别检测胞浆中、核内磷酸化p65的含量变化,一般要求高点的杂志会要求分别测这个4. IHC等也行;5. EMSA(电泳迁移技术)看看。
bamboopiggy
主要磷酸化的升高了,就可以说是被激活了
whilt-shirt
是的,只要磷酸化水平比上非磷酸化蛋白水平的值升高就能说明被激活了
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