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常规35-200之间的蛋白,应该用0.45还是用0.2um的转膜纸(pvdf)呢

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悠木A9HT

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4 个回答

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whilt-shirt

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0.45um的就可以,如果是小于10kd的蛋白那就要0.22um的

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申东熙老伯

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0.45的pvdf膜就够了,如果结果不好再试试用0.2的。

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静待花开8

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由于蛋白与膜的结合贯穿整个膜的厚度(深度),结合能力是由孔的内部表面积来决定的。0.2um PVDF膜 内部表面积大约是0.45um PVDF 膜的三倍,使其吸附能力更高。从下图实验中,可以看出,20KD以下蛋白选用0.2um PVDF膜(#ISEQ00010), 20KD以上蛋白选用0.45um PVDF膜(#IPVH00010)。

图1.延长电转时间时0.45umPVDF膜和0.2umPVDF膜结合蛋白的效果。分子量标准品(第1、3、5、7泳道)和小牛肝裂解液(第2、4、6、8泳道)通过槽转印法转移到0.45um PVDF膜和0.2um PVDF膜,并用考马斯亮蓝染色。在第一张转印膜后再放一张0.2um PVDF膜以捕获穿过的蛋白。(第5和6泳道在0.45umPVDF后面;第7和8泳在0.2um PVDF后面。即第三张膜是放在第一和第二张膜的后面)

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天一湖医者

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常规35-200之间的蛋白,应该用0.450um的转膜纸,20kd以下选0.2um的转膜纸

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