BCA法蛋白定量后，内参条带仍然不齐，怎么办？

组织定量本来靠测浓度就不准，建议：先测浓度，按浓度跑内参，然后按内参灰度调整上样量。

虽然BCA不能算特别精准的蛋白定量手法，不过你如果差的有点多的话，建议完善BCA实验的流程和手法。然后利用BCA测得的蛋白量跑一次内参，利用内参条带的灰度值，在调节依次上样量，这样你的内参就应该是基本一致的了。我觉得你可能是煮蛋白出了问题，EP管盖子没盖紧，水蒸发了，对应的蛋白浓度上去了，体积一样，上的蛋白量就不一样了。

BCA定的是总蛋白的量，不是内参的量，你可以在第一次跑完内参后用image j校准内参

1.是内参不合适，2 ，可以尝试根据内参的灰度值，再次调整上样量。