提取的蛋白放在冰箱-20可以反复冻融几次

最好不超过5次。分装EP管减少冻融次数。

可反复冻融的次数具体情况根据目的蛋白性质（主要是稳定性）而定，当然，最好是一次成功。如果说需要做大量的实验，需要一次准备很多一致性蛋白样品，那么强烈建议你在第一次冷冻前用EP管分装，分装数量和分装量根据你的实验次数和需要一次上样量确定。这样，就完全避免了多次冻融（除了第一次实验不需要冻融；这是从根本上解决你的问题）。

建议不要反复冻融。可以把提取的蛋白分装，-80或者-20都放几管分装的，这样只有一管放在-20反复冻融，冻融五六次都没关系。

尽量是减少冻融次数。然后拿出来用的时候，我们都是用之前金属浴3分钟。