李小亮亮
balalaLy
如果组间蛋白量差异比较大的前提下用BCA法定量是会有比较大的误差,所以尽量取细胞数差不多的,或者组织重量相近的。
bamboopiggy
根据细胞占皿底面积的大小,来调整加lysis的多少,然后直接上样
Eason老歌迷
应该将蛋白标准品按0, 1, 2, 4, 6,8, 10 微升加到96 孔板的蛋白标准品孔中,加灭菌双蒸水补足到10 微升;取10 微升待测样品加入96 孔板。每个测定要做2-3 个平行。而且该方法检测的蛋白质浓度范围20μg-500μg/ml;当蛋白浓度<20ug/ml 时,推荐60℃温浴,并将蛋白液:工作液的比例调至1:8 进行测定(增强法)可以检测到5ug/ml。
申东熙老伯
有的用蛋白做WB是根本不测蛋白浓度直接上样跑的。可以试着直接上样跑,根据跑出来的结果再增加或者减少蛋白调齐。