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用BCA法测蛋白浓度的时候总会存在调平失败的状况,有的时候甚至不如不调,有什么小技巧让调平更稳一些吗

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李小亮亮

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4 个回答

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balalaLy

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如果组间蛋白量差异比较大的前提下用BCA法定量是会有比较大的误差,所以尽量取细胞数差不多的,或者组织重量相近的。

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bamboopiggy

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根据细胞占皿底面积的大小,来调整加lysis的多少,然后直接上样

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Eason老歌迷

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应该将蛋白标准品按0, 1, 2, 4, 6,8, 10 微升加到96 孔板的蛋白标准品孔中,加灭菌双蒸水补足到10 微升;取10 微升待测样品加入96 孔板。每个测定要做2-3 个平行。而且该方法检测的蛋白质浓度范围20μg-500μg/ml;当蛋白浓度<20ug/ml 时,推荐60℃温浴,并将蛋白液:工作液的比例调至1:8 进行测定(增强法)可以检测到5ug/ml。

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申东熙老伯

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有的用蛋白做WB是根本不测蛋白浓度直接上样跑的。可以试着直接上样跑,根据跑出来的结果再增加或者减少蛋白调齐。

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