电泳100v，30min 120v，40min，转膜60min 封闭5小时，一抗过夜，2抗1h， lc3条带出来不直怎么办

条带不均匀可能是由于配的胶不均匀导致，因此配胶时要注意配胶用的小烧杯，水，SDS，Ｔri s，等等干净无杂质，贴边角加入液体，凝固时避免大幅度动作，保证配出来的胶均匀无杂质

wb条带不直，可能有几个原因，一个是电泳时电压稍高,造成条带弯曲,你可以就使用稍低的电压一直跑。二是倒胶时是不是温度比较低,造成的胶不均匀。三是可以多加点样。

一抗孵育了多久呢 适当增加上样量 或者增加孵育时间试试呢、

你有没有留意文献，LC3的条带很多都是这样的。可能因为它的分子量比较小，这样的图是可以用到文章中的。你也可以用15%的胶来跑，会好看很多