蛋白不是花就是拧，每次都是那个地方不好，请问是转膜的问题还是胶或者膜有问题呢

每次都是这样的话估计是你的蛋白有问题了

如果每次都是同一个地方，就可能是你转膜的夹子变形了

我觉得是转膜的问题，膜夹得不紧，小分子蛋白跑出来就花了，原因是因为转膜仪使用时间长了，两块板之间的海绵变薄了，故而使胶与膜之间存在潜在的间隙，电转移时小分子蛋白从胶和膜之间的空隙中流走，建议多加几层虑纸试试。

感觉还是你配胶的问题，没混匀，

应该是转膜的时候气泡没有去除干净，可以换一套新的三明治结构转膜试下。

胶的问题可以排除：因为其它大小的蛋白条带没有问题，如果胶的问题那么应该是从上到下都有问题。膜的问题也可以排除，因为你每次剪膜不可能剪得那么凑巧都是同一个位置出问题。个人觉得转膜的夹子或者某一位置的线路有问题