Western Blot实验40V转膜12小时,时间太长了?有什么影响吗?

转膜一般是恒流300/400mA，然后1-2个h就可以。如果您的电流是低的，转12个小时也没有问题。

其实还好，具体问题具体分析吧，如果你的目标蛋白分子量小，膜孔径又大，那就有可能过度转膜--即蛋白穿过膜而丢失。如果你的目标蛋白分子量非常大，而你的缓冲液条件不促进它的移动，则即便40V转12小时也可能转膜不足，蛋白尚未转到膜上。还是看看结果怎么样

你这时间也太长了，你用的半干转还是湿转。我们小蛋白转1个小时就够了。时间太长，容易转过劲，转到滤纸上了。

时间也不算是很长，对蛋白本身没有什么影响