请问各位大佬，本人构建了x-pET28a的质粒，转到了C43感受态里，在37℃摇起来了，结果加完诱导剂28℃越摇越澄清什么情况？

dxy_z4nidow0

2022-05-23

有同等情况的其他菌株都没有出现澄清问题

dxywode

2022-05-24

有帮助

尝试低温诱导试试，改变IPTG浓度，还是不行的话，说明你的这个整个序列载体本身就是不表达，得从头进行了。

bamboopiggy

2022-05-24

有帮助

高度怀疑是你的X-pet28a表达x蛋白后，x蛋白有细胞毒性，引起大肠杆菌死亡。

天一湖医者

2022-05-23

有帮助

.1工程菌的问题，可能携带的质粒已经丢失，工程菌不具有抗性，建议在诱导前先检测一下质粒稳定性.

2.活化诱导时加入的抗生素过低未加或失效，扩大培养时加入抗生素又过量，建议重新配制抗生素.

3.加入的IPTG浓度过高.

4.培养基的问题，营养不足.

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