大家用超敏化学发光成像仪显影western blot时是怎么加显影液的？

显影液现用现配，均匀加在条带上，然后晃匀

ab液混合反应一会，直接滴加到膜上反应一会，吸干，就可以显影了

将化学发光检测试剂盒中的A和B按照1:1混合；PVDF膜正面朝上放于暗箱，用移液枪将发光液均匀地涂在膜上，关闭暗箱箱门，进行曝光

如果免疫反应好，加荧光剂后在暗室里，可以看到很亮的条带。有时候，条带发光可以有半个小时之久。

所以在加荧光剂后，反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移动膜，否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜，小心，铺展。将准备好的胶片放在膜上，放上去后也不要再移动了。然后压片。

可以依据最初看到的荧光亮度大概判定压片时间。一般可以看到明显的荧光条带，先压三十秒。显影时，要把胶片完全浸入显影液，可以用透明的或者白色的盒子，可以看到显影，当看到胶片上有黑色条带，基本上显影可以了。多放个几秒钟，可以捞出来了，过下清水，放定影液里就可以了。

如果你觉得显影的条带过浓，就再重新压一张，时间短一点。条带浅，就压时间长点。

如果加荧光剂后并没有直接看到条带，也可以压片，这时候可能要压蛮久的。我有试过压片两个小时，或者过夜，但是结果基本不能用。

还有，显影液最好不要重复用，且用过的不要倒回原液。我用的进口的显影液，结果为了节省，用后回收，几次之后一整瓶都坏掉了。定影液可以反复用，但是最好倒出后就不要再倒回去了。