目的蛋白没有条带是什么原因？

目的蛋白没有条带的原因有很多，比如目的蛋白没有表达或者表达之后又降解了。

原因有很多，需要考虑膜上抗原量少，蛋白质制备过程中表位丢失，一抗敏感度低，或二抗使用不合适等等

1.位置切错了2抗体不好使3蛋白降解

建议首先要确定以下几个基本问题：

1.目的细胞是否表达这种蛋白？丰度如何？

2.提取蛋白的细胞裂解液是否加入了蛋白酶抑制剂？对于磷酸化蛋白是否还加入了磷酸酶抑制剂？防止蛋白降解。

3.是否按照CST建议的操作方法进行实验?

4.刺激处理是否恰当？

如果目标蛋白没有条带，周围有背景可能是你的一抗浓度较高，二抗上HRP催化活力太强，同时你的显色底物处于一个临界点，反应时间不长，将周围底物催化完，形成了空白即“反亮现象”。将一抗和二抗浓度降低，或更换新进口的显色底物。

这个因素有很多了，比如说样品浓度、孵育温度、抗体性质呀等等。