bamboopiggy
一般,拿到一抗就先1:1000 试一下,如果浅就改1:500.如果深,就改1:2000,基本差不多,二抗,问卖给你的公司,他们一般有个参考值,有的1:4000,有的1:1-2万。
天一湖医者
每个公司的抗体不一样,所以效价差别非常大,同样一抗,不同公司有1:100的也有1:2000的,即使同一个抗体,不同来源的蛋白稀释比也差别很大。
所以,最好的办法是说明书结合实际情况。
首先,一抗二抗的说明书上都会给一个合适的稀释比,比如santa的会写道(starting dilution 1:200, dilution range 1:100~1:1000),那你就从1:200开始做,如果条带非常明显,那下次可以1:400或者1:500了,如果条带非常淡,可以考虑1:150或者1:100
未来9
一抗,二抗的比例比较重要,调整好一抗,二抗的比例,可以去掉部分非特异的本底
最好的办法是说明书结合实际情况来调整比例