jhcxy1225
vae1476
每个商品化封闭液都有自己的Protocol,所以要按照说明书来做,其优点是封闭时间很快。
bamboopiggy
看你的一抗是用什么配的,如果是用封闭液配的就不用洗,否则还是洗洗的好,这样一抗里面不会带入封闭液的成分
未来9
一抗孵育完成后洗膜是为了洗掉未和膜结合的抗体,而不是磷酸盐。只有洗干净非特异性结合在膜上的一抗,加二抗时才不会因非特异结合而呈现很重的背景。至于是使用PBS(T)还是TBS(T),这要具体看你的二抗种类。PBS不适合AP系列,PBS/TBSS适合AP和HRP体系。另外,做磷酸化蛋白的WB,PBS不合适.