跑通路蛋白 总蛋白和磷酸化蛋白都升高可以说是激活了吗？ 跑的AKT和ERK两个位点都是

western主要检测信号系统中的蛋白磷酸化水平，如果磷酸化水平升高则说明蛋白激活了。另外还有检测NF-kB和DNA的结合水平，主要采用EMSA，和报告基因的方法。检测TNF,IL,iNOS,COX-2的mRNA表达（RT-PCR）。检测IkB的磷酸化，泛素化和降解（IP,Western）。

可以说明，但是最好还要跑一下上游蛋白

可以，一般p-akt增高，total的akt也会增高，只要内参齐，没问题，说明磷酸化激活了

内参一致，总蛋白升高或者降低：说明经过实验组的处理方法能够诱导总蛋白的表达或者降解。至于磷酸化活性的变化，和总蛋白的表达高低有关，该种处理方式可能同时影响该蛋白的表达与磷酸化形式，对该蛋白代表的信号通路发挥作用。