为什么wb条带的位置和kd值不一样

可以看一下抗体公司给出的参考图，可能蛋白marker在不同浓度的胶里面显示的大小不一致。

常见的因素
1.翻译后修饰，如磷酸化、糖基化等，增加了蛋白质的大小。
2.翻译后裂解，许多蛋白合成的蛋白，然后裂解成活性的形式，如亲半胱天冬酶
3.剪接变异体，选择性剪接可以从同一基因中产生不同大小的蛋白质。
4.相对电荷，氨基酸的组成（带电与非带电）
如二聚蛋白多聚体。一般会出现分子量变小的情况，尽管强的相互作用会导致分子量更高的条带的出现。

这个有可能不是你要的条带，建议重新实验

这个是因为不同配比的胶，蛋白的位置会略有差距，最好按照marker的位置切。当然不排除蛋白的修饰引起的蛋白条带位置的改变。第一跑，如果不放心，可以跑个全膜看看。