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用于纯化的亲和层析填料形式有哪些?他们各自的优缺点是什么?

相关实验:蛋白质的定量测定实验

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精彩25226

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3 个回答

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dxy_gwrp7ndq

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分类及其优缺点:

生物亲和层析

生物亲和层析是利用自然界中存在的生物特异性相互作用物质对的亲和层析。通常具有高的选择性。典型的物质对有酶﹣底物、酶﹣抑制剂、激素﹣受体等。

免疫亲和层析

利用抗原抗体中的一方为配体,亲和吸附另一方的分离系统,称免疫亲和层析。免疫亲和层析应用相当广泛。此种方法的纯化蛋白倍数活性回收率非常高。用免疫层析柱进行各种类型的免疫检测被称为免疫检测法,特别适用于检测含量低微的样品。免疫检测法利用被标记的抗体或模拟分析物来进行间接的被分析物的分析。常用标记如酶标记、荧光标记、化学荧光等。

金属离子亲和层析

金属离子亲和层析是利用金属离子的络合物或形成螯合物的能力吸附蛋白质的分离系统。目的蛋白质表面暴露的供电子氨基酸残基,如组氨酸的咪唑基,半胱氨酸的疏基和色氨酸的吲哚基十分有利于蛋白质与固定化金属离子结合。金属离子如锌和铜,已发现能很好地与组氨酸的咪唑基及半胱氨酸的疏基结合,含有不同数量的这些基团的蛋白质可以通过金属离子亲和层析得到分离。

拟生物亲和层析

拟生物亲和层析是利用部分分子相互作用,模拟生物分子结构或某特定部位。以人工合成的配基为固定相吸附目的蛋白质的亲和层析,如以染料亲和层析和氨基酸(包括多肽亲和层析)染料配基,例如三嗪或三苯甲烷化合物,能通过共价键牢固地结合到亲和载体上,染料配体与很多蛋白以及酶的活性位点相互作用,以模仿这些生物分子的底物、辅助因子或结合剂的形式进行。

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府宅

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壳聚糖被广泛用于亲和层析载体。其特点是:没有非特异性吸附作用;配基偶联方法简单。

以聚苯乙烯﹣二乙烯基苯珠为载体,用聚乙ニ醇修饰其表面,制成了新的亲和层析载体。这种载体具有良好的机械强度,且 PVA 涂层消除了疏水相互作用,避免了非特异性吸附的发生。因此,研制价格低廉、机械强度高、活化效率高的新型载体是亲和层析的一大热点。

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bamboopiggy

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1.Heparin Sepharose FF 填料:适用于各种蛋白的血浆蛋白纯化,包括抗凝血酶 III 抗体和凝血因子。肝素配基可实现稳定偶联化学和化学稳定的固定配体。

2. IMAC Sepharose 6 FF 填料:可选择性共价偶联金属离子,以形成螯和金属离子亲和层析 (IMAC) 来纯化多组氨酸标签蛋白

3. Blue Sepharose FF 填料:针对白蛋白、酶(包括 NAD+ 和 NADP+)、凝血因子、干扰素及相关蛋白纯化而进行方法优化和参数筛选的极佳选择。

4.Benzamidine Sepharose 4 FF 填料:旨在用于去除和/或纯化丝氨酸蛋白酶

5.Blue Sepharose High Performance :可捕获多种生物分子,包括:白蛋白、干扰素、多种核苷酸依赖性酶、α2-巨球蛋白、凝血因子及相关蛋白。

6.Capto AVB 亲和层析填料,设计用于纯化腺相关病毒 (AAV)。

7.Capto Lentil Lectin 是一种亲和层析填料,用于纯化糖蛋白和其他含有碳水化合物的分子,如 α-D-甘露糖、α-D-葡萄糖或空间相关性残基。

8 Con A Sepharose 4B 填料,该填料可用于便捷分离和纯化糖蛋白、多糖和糖脂。

以上信息参考:https://www.cytivalifesciences.com.cn/

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