凯式定氮法与双缩脲法测定时的异同。

凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1-10m

双缩脲法有重复性、线性关系好的优点，有灵敏度低、测定范围窄、样品需要量大等不足。

凯氏定氮法进行蛋白质检测的，测定范围在0.1mgN～200mgN(毫克氮)（含氮量0.02% ～ 95%），需要的样品量也不像双缩脲法的那么大，只需要几克就行，因此，能够满足样品量不那么丰富的物质测定。

双缩脲法：双缩脲法对白蛋白、红蛋白的颜色反应相近，不受温度影响。测试速度快，但是灵敏度低，不适合高精度的蛋白质含量测定。测定范围为1-20mg。常用于谷物蛋白质含量的测定。　　

凯氏定氮法：凯氏定氮法是最经典的测定蛋白质含量的方法，其需要使用的有定氮仪或者粗蛋白测定仪。粗蛋白测定仪的原理跟定氮仪一样，都是利用氮的含量来计算蛋白质的含量。凯氏定氮法是测定试样中总有机氮最准确和最简单的方法之一,是被国内外作为法定的标准检验方法。它包括消化、蒸馏、吸收、滴定四个过程，在催化剂作用下,试样用浓硫酸消煮破坏有机物,使其中的蛋白质氮及其他有机氮转化为氨态氮,然后与硫酸结合生成硫酸铵,加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出含氮量,将结果乘以换算系数,计算出粗蛋白质含量。

前者是依据氮元素的含量来测定的，后者是和蛋白质中的某些化学键显色反应。而三聚氰胺就是因为含有大量的氮元素而被不法分子用来获得较高的蛋白质含量检测结果的，这也反映了凯氏定氮的不足之处。

凯式定氮法是依据氮元素的含量来测定的，双缩脲法和蛋白质中的某些化学键显色反应，原理不同，都用于蛋白质测定。