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做WB有什么要注意的吗

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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努力搞科研的琳琳

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4 个回答

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66QB1H

有帮助

1.选择合适的分离胶浓度

2.选择合适的电压、电流

3.选择合适的一抗和二抗,并注意一抗二抗浓度和孵育条件(时间、温度等)

3.洗脱时注意时间,太长太短都有影响

4.配胶和转膜过程都要防止气泡

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刹那芳华2333

有帮助

蛋白提取要避免降解,转膜注意不要使膜变热,抗体要选择对应的一抗二抗,封闭时间要充足,最好选用脱脂牛奶或者BSA

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Kimser

有帮助

确实注意事项很多,虽说熟能生巧,但扎实的理论基础可以让你避免很多错误,多看一些前辈的经验。这里提醒一下刚开始做的时候注意控制好各步骤的时间,一抗二抗的浓度,甚至转膜时蛋白太大还要多加一些sds

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whilt-shirt

有帮助

有很多,第一恒压电泳恒流转膜,第二转膜时黑胶白膜,第三选择合适的封闭时间和封闭液,第四选择合适的一抗,第五选择和一抗对应的二抗,第六选择合适的发光液

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