如何检测两个蛋白质相互作用的强弱？

相关实验：相互作用蛋白鉴定实验

丁香实验

2021-12-03

假设A和B两个蛋白具有相互作用，现在将B蛋白进行突变（只是将作用位点的氨基酸进行突变），如何检测B突变后两个蛋白质相互作用的能力变化。能说说实验的简要步骤吗？

1 个回答

丁香实验

2021-12-03

有帮助

免疫共沉淀Co-IP。 1. 转染，A与WT/MUT分别共转细胞； 2. 裂解后，用anti-A抗体与lysates孵；加入结合抗体的proteinA/G beads结合； 3. 洗beads。 4. 洗脱。 5. WB，观看结合在beads上的A,B多少。A做内参control。看结合的B的差别。