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western Blot 检测心肌中,模型大鼠处死后取心肌组织,怎样提取细胞蛋白?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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xjxsch

初学者,问个问题,模型大鼠处死后取心肌组织,怎样提取细胞蛋白,然后WB检测心肌Smad2蛋白表达呢?
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1 个回答

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fmmuzhangfuyang

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1.大鼠处死后剪取心脏,迅速用4摄氏度预冷PBS洗净血液,液氮速冻后移置负80摄氏度冰箱冻存
2.提取时按照每毫克组织加入100ulRIPA裂解液,然后机械匀浆,12000r/min离心抽取上清,按照体积比1:4加入5乘loading buffer,95度10min,即可用于WB检测
3.其余无特殊按照WB步骤进行
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