western Blot 检测心肌中，模型大鼠处死后取心肌组织，怎样提取细胞蛋白？

相关实验：蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)

xjxsch

2013-11-26

初学者，问个问题，模型大鼠处死后取心肌组织，怎样提取细胞蛋白，然后WB检测心肌Smad2蛋白表达呢？

1 个回答

fmmuzhangfuyang

2013-11-29

有帮助

1.大鼠处死后剪取心脏，迅速用4摄氏度预冷PBS洗净血液，液氮速冻后移置负80摄氏度冰箱冻存
2.提取时按照每毫克组织加入100ulRIPA裂解液，然后机械匀浆，12000r/min离心抽取上清，按照体积比1:4加入5乘loading buffer，95度10min，即可用于WB检测
3.其余无特殊按照WB步骤进行