谷胱甘肽标签蛋白包涵体纯化方法？

我也是使用GST标签蛋白，用全式金蛋白纯化方法，试剂盒要求过柱纯化前先变性再复性，在尿素透析复性过程中一直出现沉淀，请问怎么解决

您好，需要您自己探讨

包涵体可以在变性后和复性后2种思路来纯化蛋白，甚至2M、4M、8M尿素变性情况都有差别。
总体说来：包涵体先梯度0-8M尿素清洗（或沉淀）来洗涤，尽可能除去杂蛋白，最后用8M尿素溶解。1低温降低尿素透析复性，使蛋白折叠，之后做GST亲和，以及其他层析；2变性状态下做纯化，思路用复性后一致。关键是既然你蛋白不能在GST标签融合后可溶表达，所以加不加GST没多大意义了，纯化是简单了点，但如果成药，后续GST去除和残留检测等等挺麻烦。

都是包涵体，那要先复性呢。