为什么一定要加內参？有的样品里如尿液中蛋白分析无合适內参怎么办？

相关实验：蛋白质免疫印迹(Western Blot，WB)

a5055778

2013-10-21

如题，按理说，加內参是为了保证上样总量一致，但上样之前已经用bca或者bradbord法测定了样品的浓度，加入各自对应体积保证了上样量的一致，为什么还要多此一举加內参。尿液里的蛋白哦没有合适內参怎么办？

1 个回答

alaling

2013-10-22

有帮助

加入内参是为了消除外部操作产生的差异。比如你需要加样1ul，你能保证枪加入的就一定准确的是1ul吗？枪尖随便挂个0.1ul和不挂，差别就有10%。尿液里的蛋白如果没有合适的内参，可以考虑以添加外参的方式进行，就是在每个样品里面添加已知量的某种纯蛋白。当然，如果用纯体积或纯样品量进行参比也是可以的。最重要的是要参考文献，看看大部分人是如何处理这种问题的。