求助western blot非特异条带非常多

yha1985

2014-12-24

第一次跑Western blot，非特异条带非常多（如图）。请问各位高手，如何解决这个问题呢？出现这个问题的原因是没有封闭好吗？用的是AP标记的抗体。1%BSA封闭1小时，一抗孵育2小时，二抗孵育1小时~显色10min

hw26904636

2014-12-30

有帮助

我感觉抗体原因很重要。封闭1个小时应该够了。一抗孵育选择4度摇床过夜可以减少非特异性的表达

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