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WB,条带特别多,不知道是哪条?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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我是金博士

前天做了一次S6K,结果就是下面这个图,发现条带特别多,不知道具体应该是哪条(第一列是marker,从上到下分别是100、70、55kd)?然后marker也显色了,这是什么原因呢?一抗是abcam的Anti-S6K1 antibody ab9366,电泳和电转液都是华兴博创的1undefined电泳、电转缓冲液;电转液稀释是电转液:甲醇:水=1:2:7电泳条件:90V 30min之后120V 90min,电转条件:90V 60min 最后我想先了解一下4EBP1和M-TOR的条件,比如浓缩胶和分离胶的浓度,电泳和电转的条件和时间,麻烦前辈指点一下~ 另外听说4EBP1做出来不止一个条带,那前辈你做的时候条带大约在多少KD呢?
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2 个回答

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moxucheng

有帮助
二抗有问题
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我是金博士

有帮助
1、S6K应该会有几条分子量不同的条带吧,这个条带有点多,抗体用多大的稀释度?稀释一下一抗2、4EBP1没做过 3、mtor用8%的胶,电泳的话,170KDmarker进入胶2cm左右,300mA湿转2h30min到3h都可以
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