做 WB，一抗和 marker 怎样选取？

一般选择的原则是去文献中找，看看别人做和你一样的目的蛋白的时候用的都是哪家得抗体，都有介绍的，看看图片效果怎么样。多找出一些文献，然后根据你掌握的信息选择一种最便宜，最高效，特异性最好的抗体。一般做科研的人都是这么选择抗体的，不能蒙着买，毕竟不便宜的。

个人觉得一抗的话是abcam，cell signaling technology,santa cruz,bioworld这几家公司的不错 ，也比较常用，购买一抗的时候要注意它的试用范围，比如说使用的物种，主要就是H\M\R，指的是人、小鼠和大鼠，还有就是它适合做哪些实验，最常规的就是WB\IF\IMH等。而marker的话就是要根据自己的目的蛋白的大小来决定了，一般选接近的，如果分子量比较小的话就选择范围小一点的marker，这样最后条带分的比较开，便于裁胶，如果几个目的蛋白大小相差悬殊的话，就需要选择范围大一点的marker了。

abcam，cellsignal，santa原装大都靠谱；国产三鹰的不错。

WB常用的抗体一般是由卖的，尤其是拟南芥、水稻等，还有就是自己克隆出目的蛋白，让公司定制；marker是根据目的条带的大小来选择，最好在条带附近的maker条带要密集一点，便于鉴定。

根据你目的蛋白是人的还是动物的，从abcam网站上查询相应抗体货号，然后从国内试剂商那订购就行。

一抗的选择 当然是看你实验需要撒。至于是哪家公司的，我们做的大部分是Santa Cruz,abcam,proteintech,还有就是国产生工的。

一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的，一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体，而且一般应选择效价较高的抗体。而MARKER则要取决于你的目的蛋白的分子大小了，选择相应的marker,marker最好要能比较容易的区分条带是否为目的蛋白，即在目的蛋白这一分子大小附近最好是能区分度较大，相应的分子大小的梯度要便于区分。