dxy_ai11ha80
RNAi后靶标基因为没有达到预期干扰掉,相反的定量结果显示高表达了WHY?
dxy_ylybeuvq
我也出现了这个问题,请问您后来解决了吗?是重新设计了干涉基因的目的序列还是?
huarenqiang5
考虑可能是靶标基因功能存在一定问题。
土井挞克树
RNAi会有两条调节通路,考虑是负反馈高表达了
dxyc42u
有时候干扰效率不高,细胞会反馈性高表达
loveliufudan
NA干扰(RNAi)是通过介导特定靶标mRNA的降解来抑制基因表达的过程。如果您在RNAi实验中没有观察到预期的靶标基因降解,并且发现靶标基因的定量结果显示高表达,可能有以下一些原因:
有效的RNAi寡核苷酸(siRNA)不够:RNAi实验中最常用的方法是使用siRNA,如果siRNA的浓度不足或质量不好,则可能无法实现有效的靶标基因降解。
靶标基因存在剪切变异体:靶标基因可能有多个剪切变异体,在RNAi实验中可能只抑制了其中一个变异体的表达,而其他变异体的表达却没有受到影响,从而导致总的靶标基因表达量没有降低。
RNAi可能导致反向调节:一些研究表明,RNAi也可能导致反向调节,即在RNAi过程中,靶标基因的表达量实际上会增加。这可能是由于RNAi诱导了一些代偿性反应,使得细胞尝试通过增加靶标基因的表达来抵消RNAi诱导的效应。
无关基因的表达发生变化:RNAi实验可能会导致一些无关基因的表达发生变化,从而影响到靶标基因的表达。例如,RNAi可能导致一些共同调节因子的表达发生变化,从而影响到多个基因的表达。
综上所述,RNAi实验中靶标基因高表达的原因可能有很多种,需要仔细分析实验的设计和结果,以确定具体的原因。
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